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退火緩沖液（5×）說明書
貨號(hào)：D2810
規(guī)格：1ml/5ml
保存：室溫儲(chǔ)存，有效期少12個(gè)月。
產(chǎn)品說明：
DNA 退火緩沖液(Annealing Buffer for DNA Oligos)，即DNA 寡核苷酸退火緩沖液，該退火緩沖液不僅可以
用于常規(guī)的DNA Oligo 的退火，而且特別適合于較難退火的用于siRNA 質(zhì)粒構(gòu)建的DNA Oligo 的退火。使用
DNA 退火緩沖液（5×）可以有效避免DNA Oligo 自身形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)，并且兩條Oligo 退火后可以直接和經(jīng)酶
切純化的質(zhì)粒連接。通常轉(zhuǎn)化后可以得到大量的陽性克隆。
使用本試劑操作非常簡單，只需把待退火的DNA Oligo 和DNA 退火緩沖液（5×）按照一定比例混合后，
置于PCR 儀上，約60 分鐘即可完成。
操作步驟：
1. 用去離子水將DNA 退火緩沖液（5×）稀釋成1×工作濃度。
2. 用DNA 退火緩沖液（1×）分別溶解互補(bǔ)的兩條DNA 寡核苷酸單鏈，使它們的摩爾濃度相等；
3. 取相同體積的步驟2 中得到的寡核苷酸單鏈溶液混合，置于PCR 反應(yīng)管中，樣品不要用礦物油覆蓋。
4. 將PCR 反應(yīng)管置于PCR 儀中，設(shè)置反應(yīng)條件： 95℃變性2min；緩慢降溫25℃，降溫過程用時(shí)少
45min；產(chǎn)物可4℃短暫保存，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。長期保存可于-20℃凍存。
注意事項(xiàng)：
1. DNA 退火緩沖液(5X) 只適合于DNA oligo 的退火，不能用于RNA oligo 的退火。
2. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。