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G7210 PAGE凝膠銀染試劑盒

規(guī)格: 1L

保存: 室溫(15℃-25℃) 干燥保存，復(fù)檢期12 個(gè)月。

試劑盒內(nèi)容： 

**銀 2g

染色液A 100ml

顯色液B 100ml

顯色液C 100ml

終止液D 100ml

注：1L 規(guī)格指可配制的**銀染色液的體積，實(shí)際使用次數(shù)根據(jù)PAGE 膠大小不同而不同。

二、G7210 PAGE凝膠銀染試劑盒的簡(jiǎn)介:

核酸銀染的原理是銀離子可與核酸形成穩(wěn)定的復(fù)合物，然后用還原劑如甲醛在堿性環(huán)境下使Ag+還原成銀

顆粒，可把核酸電泳帶染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝膠電泳染色。其靈敏度比EB 高200 倍，該產(chǎn)品

整個(gè)過(guò)程只需要20 分鐘，操作簡(jiǎn)單，靈敏度高，能檢測(cè)到10ng 以下的DNA 條帶。

三、的使用操作步驟:

一、染色液配制

需要配制的染色液體積根據(jù)PAGE 膠的大小而定，一般的mini-PAGE 膠需要20-30mL。配制用的器皿清洗

干凈后用去離子水涮洗，染色液須用去離子水配制，現(xiàn)用現(xiàn)配。如果配制的溶液體積不是100mL，可以按比例

改變各成分用量。

1，**銀染液：稱取0.2g **銀，加入到90ml 去離子水中*溶解，加入10ml 溶液A 混勻，現(xiàn)用現(xiàn)配。

2，顯色液：分別取溶液B 和溶液C 各10ml 加入80ml 去離子水中混勻，現(xiàn)用現(xiàn)配。

3，終止液：取終止液D 10ml 加去離子水稀釋100ml，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二、：

1，PAGE 電泳結(jié)束后，將PAGE 蛋白膠轉(zhuǎn)移玻璃平皿或搪瓷盤中，用去離子水漂洗兩遍，每次2min。

2，將PAGE 膠轉(zhuǎn)移**銀染液中，使染液沒(méi)過(guò)PAGE 膠，室溫染色10min。可置于搖床上緩慢搖晃，使

其染色均勻。

3，棄去染色液，用去離子水快速漂洗三次，每次半分鐘。

4，將PAGE 膠轉(zhuǎn)移顯色液中，使顯色液沒(méi)過(guò)PAGE 膠，室溫?fù)u晃顯色條帶清晰可見(jiàn)。

5，可選，將PAGE 膠轉(zhuǎn)移終止液中，終止顯色1min。

6，銀染后PAGE 膠可拍照保存或用于后續(xù)試驗(yàn)。

四、PAGE 凝膠快速銀染試劑盒的注意事項(xiàng)：

1. 銀染主要出現(xiàn)在PAGE 膠的表面，使用薄膠（0.5-0.75mm）可以提高靈敏度。

2. 對(duì)于考馬斯亮藍(lán)染色的SDS-PAGE 膠，可用甲醇將膠漂洗后，繼續(xù)進(jìn)行銀染。考染過(guò)程中的乙酸會(huì)干

擾銀染，因此要確保將PAGE 凝膠中殘留的乙酸*洗凈。

3. 不同蛋白質(zhì)對(duì)銀染的反應(yīng)是不一樣的，尤其是堿性蛋白染色效果差。因此，不宜用銀染測(cè)定不同蛋白

的比例。

4. 染色過(guò)程中，緩慢的振蕩是必要的，一般選擇40-60 rpm.

5. 凝膠表面的裂紋多是由于壓力、手印及表面干燥所致，所以全程中都應(yīng)帶手套操作。

6. PAGE 凝膠背景呈均一的黑色多是水中的雜質(zhì)引起的，所以溶液的配制應(yīng)使用電導(dǎo)率小于1 μS 的去離

子水。

7. 如果染色后有呈灰塵或煙霧狀灰色或棕色的沉淀出現(xiàn)在凝膠表面，可能是在幾步漂洗過(guò)程中洗得不夠

*，或是染色過(guò)程時(shí)溫度太低。

8. 較深的銀染背景多是丙烯酰胺中的雜質(zhì)所致。

9. PAGE 膠中的甘油、尿素、甘氨酸、Triton X-100 和兩性電解質(zhì)這些物質(zhì)會(huì)干擾銀染。

10. 室溫操作時(shí)，溫度的波動(dòng)往往會(huì)干擾銀染的效果，恒溫水浴可以解決這個(gè)問(wèn)題。

11. 憑借戊二醛預(yù)處理可以使各種蛋白質(zhì)的染色提高40 倍。

12. 染色使用的玻璃器皿必須非常干凈，用酸浸泡可以滿足要求。

13. 銀染應(yīng)盡快照相，隨著時(shí)間延長(zhǎng)，蛋白條帶會(huì)變淺，而背景會(huì)加深。

14. 銀染容器理想的是玻璃平皿，其次是搪瓷盤和密胺塑料盤等。

五、與PAGE凝膠快速銀染試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：

P1305 考馬斯亮藍(lán)染色液

P1300-500 考馬斯亮藍(lán)蛋白膠快速染色液

P0012 10×麗春紅染色液

PR1400 低分子量蛋白MARKER

PR1700 預(yù)染次高分子量蛋白MARKER

P1300 SDS-PAGE 凝膠制備試劑盒